摘要：白酒氣相色譜分析法主要有外標(biāo)法、歸一化法和內(nèi)標(biāo)法3種，數(shù)據(jù)處理主要使用色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)或色譜工作站自動計算。 白 酒氣相色譜分析法主要酯類物質(zhì)的測定宜用外標(biāo)法；醇、醛、酯的測定宜用內(nèi)標(biāo)法；微量成分的定量分析宜用雙內(nèi)標(biāo)法；單體香精香料的分析宜用歸一化法。降低消 除氣相色譜誤差的方法有：過濾凈化載氣、定期更換硅橡膠墊、調(diào)整氫氣流速、準(zhǔn)確進(jìn)樣、控制點(diǎn)火條件、準(zhǔn)確校正因子、進(jìn)樣速度適宜、合理調(diào)節(jié)輸出信號的衰 減、定期老化色譜柱、定期清理色譜柱頭、正確配制和使用標(biāo)樣及內(nèi)標(biāo)物。 在白酒生產(chǎn)過程中，為了更好地評價白酒的質(zhì)量除了感官品評之外，分析其微量成分也是一個重要方面。要確定白酒中微量成分的含量，適宜及簡便的方式是采用氣相色譜分析。 1、色譜柱的選用 白 酒色譜分析使用的儀器為氣相色譜儀，其核心是色譜柱，色譜柱主要分為填充柱和空心毛細(xì)管柱兩類。在選用色譜柱時，應(yīng)保證所測主要組分*分離。在白酒行 業(yè)，填充柱應(yīng)用較為普遍，填充柱根據(jù)固定液的不同分為DNO（鄰苯二甲酸二壬酯）柱和PEG（聚乙二醇）柱兩種。 1.1PEG填充柱 分析白酒中主要微量成分時，由于己酸乙酯先于乳酸乙酯通過填充柱，特別是做快速分析時，己酸乙酯容易成為乙醇拖尾上的峰，造成較大的分析誤差。在使用DNP填充柱時，己酸乙酯后通過填充柱，克服了以上弊端，所以在分析濃香型白酒時，宜選用DNP填充柱。 1.2毛細(xì)管柱 一般為交聯(lián)鍵合聚乙二醇柱，酸性聚乙二醇柱能耐水基樣品的損害。毛細(xì)管柱分析條件要求較高，主要用來進(jìn)行科研分析，可分析白酒中的50多種微量成分。 2色譜分析定量方法 白酒氣相色譜分析方法主要有3種：外標(biāo)法、歸一化法、內(nèi)標(biāo)法，3種分析方法各有其優(yōu)缺點(diǎn)。對于數(shù)據(jù)的處理，目前主要使用色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)或色譜工作站自動計算。 2.1外標(biāo)法 又 稱已知樣品校正法或標(biāo)準(zhǔn)曲線法，具體方法為配制已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣進(jìn)行色譜分析，計算出校正因子，然后在與標(biāo)準(zhǔn)樣相同的操作條件下，注入同樣體積的被分析試 樣，根據(jù)已求校正因子獲得被分析試樣中微量成分的含量。一般常規(guī)快速控制分析適宜采用此法，例如半成品糧食酒的入庫驗級把關(guān)。該方法操作簡單，分析結(jié)果的 準(zhǔn)確性主要取決于進(jìn)樣量的重復(fù)性及操作條件的穩(wěn)定程度。 2.2歸一化法 當(dāng)被測樣品中的所有組分 都能流出色譜柱，并且在色譜圖上都顯示色譜峰時，可采用此法直接進(jìn)樣計算各組分的百分比含量。此法簡便、準(zhǔn)確，進(jìn)樣量的變動與結(jié)果無關(guān)，儀器與操作條件稍 有變動時，對結(jié)果影響也較小。缺點(diǎn)是要求被測樣品中組分不能太多，而且必須都能流出色譜柱并能被測量。 2.3內(nèi)標(biāo)法 當(dāng)試樣中所有組分不能全部出峰，或只要求測定試樣中部分組分時，可采用此法。此法的優(yōu)點(diǎn)是進(jìn)樣量不要求嚴(yán)格控制，可避免進(jìn)樣量變化造成的誤差。由于每次分析都要準(zhǔn)確向被測試樣中加入內(nèi)標(biāo)物，并且分析時間較長，不適用于快速控制分析。 3定量分析方法的合理選用 在實(shí)際分析過程中，應(yīng)根據(jù)不同的分析需要合理選用定量分析方法，大限度地降低分析誤差。 3.1主要酯類物質(zhì)的測定 常規(guī)分析時，如果只檢測白酒中的主要酯類物質(zhì)，宜選用外標(biāo)法。使用同一臺色譜儀，采用外標(biāo)法及內(nèi)標(biāo)法分析同一白酒樣品，測得的己酸乙酯含量。 由數(shù)據(jù)對比可知，采用外標(biāo)法分析結(jié)果的重復(fù)性較好。在測定白酒中的己酸乙酯時，盡管性標(biāo)準(zhǔn)要求采用內(nèi)標(biāo)法，從準(zhǔn)確性和快捷性考慮，宜選用外標(biāo)法進(jìn)行分析。 3.2主要的醇、醛、酯成分的測定 當(dāng)測定白酒中主要的醇、醛、酯成分時，色譜柱應(yīng)選用DNP填充柱，分析方法宜選用以乙酸正丁酯作內(nèi)標(biāo)的內(nèi)標(biāo)法，該方法可定量白酒中15種左右的主要微量成分。 3.3各種微量成分的定量分析 白 酒質(zhì)量的高低，取決于白酒中各種微量成分的協(xié)調(diào)作用。在實(shí)際生產(chǎn)中，特別是在科研試驗中，為了提高白酒的質(zhì)量，就要對白酒中的各種微量成分進(jìn)行定量分析， 這時色譜柱應(yīng)選用毛細(xì)管柱，分析方法應(yīng)采用內(nèi)標(biāo)法。使用毛細(xì)管柱分析時，由于內(nèi)標(biāo)物叔戊醇不易購買，一般采用乙酸正戊酯、2-乙基正丁酸作內(nèi)標(biāo)的雙內(nèi)標(biāo)分 析方式。 3.4單體香精香料的分析 配制色譜分析用標(biāo)準(zhǔn)樣時，為了保證標(biāo)準(zhǔn)樣的準(zhǔn)確性，在配制前應(yīng)對所用單體香精香料進(jìn)行分析，確定其含量，這時宜選用歸一化法。 4氣相色譜誤差分析 己 酸乙酯含量是國家濃香型白酒標(biāo)準(zhǔn)控制的指標(biāo)之一，按性檢驗標(biāo)準(zhǔn)要求，用氣相色譜分析己酸乙酯含量時，對同一樣品兩次測定值之差不得超過5%。在實(shí) 際分析過程中，應(yīng)大限度地減小各種分析誤差。色譜分析誤差除受色譜儀和色譜柱本身的特性決定之外，還受各種操作條件、溫度設(shè)置、載氣流量及其他外界因素 的影響。 4.1載氣氣體須過濾凈化 載氣中的水分能對色譜柱特別是毛細(xì)管柱造成較大損害，氫氣、氧氣中的水分及烴類等雜質(zhì)易引起基流增大，噪聲增大，降低靈敏度。一般使用分子篩、硅膠、活性炭等作干燥凈化劑。 4.2應(yīng)定期檢查更換汽化室的硅橡膠墊 橡膠墊使用一段時間后，容易漏氣，特別是在開機(jī)、起始，更容易產(chǎn)生漏氣現(xiàn)象，一旦出現(xiàn)色譜峰異常或峰高突然降低，應(yīng)檢查漏氣。 4.3合理調(diào)整氫氣流速 每一載氣流速下都有一佳氫氣流速，而低于或高于佳氫氣流速，都會使峰高降低，影響氫焰離子化檢測器的靈敏度，導(dǎo)致誤差升高。 4.4保證進(jìn)樣準(zhǔn)確 白酒色譜分析一般采用微量注射器定量體積進(jìn)樣，每次進(jìn)樣前，應(yīng)將進(jìn)樣器用被測樣品抽洗至少次并排掉氣泡，保證所進(jìn)樣品濃度不發(fā)生變化。抽取樣品時，應(yīng)嚴(yán)格控制液面讀數(shù)，以眼睛與液面刻度平視為準(zhǔn)，進(jìn)樣器附著液滴用濾紙吸凈。 4.5嚴(yán)格控制色譜儀點(diǎn)火條件 為防止冷凝，影響氫焰離子化檢測器的靈敏度，在檢測器點(diǎn)火前，應(yīng)保證其溫度在100℃以上。接通氫氣后，應(yīng)及時點(diǎn)火，防止氫氣大量積聚檢測室后發(fā)生爆鳴現(xiàn)象。 4.6準(zhǔn)確獲取校正因子 為了保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，色譜儀經(jīng)加熱穩(wěn)定之后，在采用外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行分析之前，應(yīng)首先準(zhǔn)確分析標(biāo)準(zhǔn)樣，以求校正因子。 4.7掌握適當(dāng)進(jìn)樣速度 汽 化室溫度一般比柱溫高幾十度，以保證所有組分瞬間汽化。試樣進(jìn)入色譜柱后僅占柱端的一小段，即以“塞子”的形式通過色譜柱，如果進(jìn)樣速度太慢，試樣起始寬 度增加，出峰時導(dǎo)致色譜峰嚴(yán)重擴(kuò)張，反之，如果進(jìn)樣速度太快，導(dǎo)致色譜峰過窄，都會影響相鄰組分峰的分離。一般要求進(jìn)樣在1s內(nèi)完成。 4.8合理調(diào)節(jié)色譜儀輸出信號的衰減 保證各組分在色譜圖上都有一個適當(dāng)?shù)姆甯撸阌谟^察色譜峰是否正常，必要時，可以根據(jù)峰高適當(dāng)調(diào)整進(jìn)樣量。 4.9定期老化色譜柱 長期使用的色譜柱，容易產(chǎn)生高沸點(diǎn)組分在色譜柱內(nèi)的殘留，導(dǎo)致檢測器噪聲變大，這時可對色譜柱進(jìn)行適當(dāng)?shù)睦匣和ㄒ暂d氣，在高于使用柱溫20℃但要低于高使用溫度條件下保持恒溫適當(dāng)?shù)臅r間，以使殘留高沸點(diǎn)組分流出。 4.10定期清理色譜柱頭 色譜儀長期使用后，橡膠墊脫落的碎屑會積聚在色譜柱頭或襯管內(nèi)，影響載氣的正常通過。 4.11標(biāo)準(zhǔn)樣及內(nèi)標(biāo)物的正確配制和使用 色 譜分析用標(biāo)準(zhǔn)樣及內(nèi)標(biāo)物要嚴(yán)格按程序配制，確保含量的準(zhǔn)確性，使用時嚴(yán)格控制容量。配制的標(biāo)準(zhǔn)樣及內(nèi)標(biāo)物應(yīng)在低溫環(huán)境下保存，經(jīng)過一定時期后，應(yīng)重新配 制，防止因揮發(fā)造成微量成分含量的變化。總之，為大限度地降低色譜分析誤差，提高色譜分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，除保證氣相色譜儀的穩(wěn)定性和合理選用色譜柱之 外，還要根據(jù)分析需要選擇合適的定量分析方法，并嚴(yán)格操作，控制各種人為因素及外界因素的影響。