在正常情況下,色譜柱至少可以使用3—6個月,能完成數(shù)百次以上的分離。但是,若操作不慎,將使色譜柱很易損壞而不能使用。因此為了保持柱效、柱容量及滲透性,必須對色譜柱進行仔細地保養(yǎng)?! ?/span>
1.色譜柱極易被微小的顆粒雜質培塞,使操作壓力速升高而無法使用,因此必須將流動相仔細地蒸餾或用0.45μm孔徑的濾膜過濾。在流動相組貯槽與色譜柱間,安裝0.45μm孔徑的過濾器。在柱子上端接頭處裝上多孔過濾片,以防止固體顆粒進入色譜柱中。在水溶液流動相中,細菌容易生長,可能堵塞篩板加入0.01%NoHa能防止能防止細菌生長。
2.使用進祥閥進樣,以防止注射器進樣時、注射隔膜碎屑堵塞柱子入口?!?/span>
3.對硅膠基鍵合相填科,水溶液流動相的PH值不得超出2—8.5的范圍,使溫度不宜過高。柱子在酸性或堿性條件下使用之后,。應依次用水、甲醇清洗,對暫時不用而需要較長時間保存的柱子,要用純甲清洗,柱子兩端用金屬螺帽封閉,保存于干凈的有機溶劑中。
4.要防止色譜柱被振動或撞擊,否則柱內填料床層產生裂縫和空隙,會使色譜峰出現(xiàn)“駝峰”或“對峰”?! ?/span>
5.要防止流動相逆向流動,否則將使固定相層位移,柱效下降。
6.使用保護柱。連續(xù)注射含有未被洗脫樣品時,會使柱效下降,保留值改變。為了延長柱壽命,在進樣閥和分析柱間加上保護柱,其長度一般為3—5cm,填充與分析柱性質相似的表面多孔型固定相,因此可干法填裝。而且價廉、更換容易。實驗表明,使用保護柱后,除了使擴為零的組分的塔板數(shù)減少外,其柱效下降很少。